液相色譜儀進(jìn)樣方式

液相色譜儀的進(jìn)樣裝置要求密封性好，死體積小，重復性好，保證中心進(jìn)樣，進(jìn)樣時(shí)對色譜系統的壓力和流量影響小。HPLC進(jìn)樣方式有隔膜進(jìn)樣、停流進(jìn)樣、閥進(jìn)樣和自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣等。

一、隔膜進(jìn)樣：

        用微量注射器將樣品注入專(zhuān)門(mén)設計的與HPLC色譜柱相連的進(jìn)樣頭內，可把樣品直接送到色譜柱填充床的中心，死體積幾乎等于零，可獲得*柱效，且價(jià)格便宜，操作方便。但不能在高壓下使用（如10MPa以上）；隔膜容易吸附樣品產(chǎn)生記憶效應，使進(jìn)樣重復性只能達到1%～2%；能耐各種溶劑的橡皮不易找到，常規分析使用受到限制。

二、停流進(jìn)樣：

        可避免在高壓下進(jìn)樣。但在HPLC中由于隔膜的污染，停泵或重新啟動(dòng)時(shí)往往會(huì )出現鬼峰；保留時(shí)間不準。在以峰的始末信號控制餾分收集的制備色譜中，效果較好。

三、閥進(jìn)樣：

        HPLC分析常用六通閥，其關(guān)鍵部件由圓形密封墊（轉子）和固定底座（定子）組成。由于閥接頭和連接管死體積的存在，柱效低于隔膜進(jìn)樣（約下降5%～10%），但耐高壓（35～40MPa），進(jìn)樣量準確，重復性好（0.5%），操作方便。

  1、六通閥進(jìn)樣方式：

（1）部分裝液法進(jìn)樣：

        進(jìn)樣時(shí)，進(jìn)樣量應不大于定量環(huán)體積的50%（zui多75%），要求每次進(jìn)樣體積準確、相同。

        此法進(jìn)樣的準確度和重復性決定于注射器取樣的熟練程度，而且易產(chǎn)生由進(jìn)樣引起的峰展寬。

（2）*裝液法進(jìn)樣：

        進(jìn)樣時(shí)，進(jìn)樣量應不小于定量環(huán)體積的5～10 倍（zui少3倍），這樣才能*置換定量環(huán)內的流動(dòng)相，消除管壁效應，確保進(jìn)樣的準確度和重復性。

  2、六通閥使用和維護注意事項：

（1）樣品溶液進(jìn)樣前必須用0.45μm濾膜過(guò)濾，以減少微粒對進(jìn)樣閥的磨損。

（2）轉動(dòng)閥芯時(shí)不能太慢，更不能停留在中間位置。否則流動(dòng)相受阻，使泵內壓力劇增，甚至超過(guò)泵的zui大壓力，再轉到進(jìn)樣位時(shí)，過(guò)高的壓力將使色譜柱損壞。

（3）為防止緩沖鹽和樣品殘留在進(jìn)樣閥中，每次分析結束后應沖洗進(jìn)樣閥。通?？捎盟疀_洗，或先用能溶解樣品的溶劑沖洗，再用水沖洗。

四、自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣：

        用于大量樣品的常規分析。